Tese |
Título |
Marcadores moleculares aplicados à análise da contaminação com agrotóxicos e a genética de populações da broca da cana de açúcar Diatraea saccharalis (Fabri-cius, 1794) (Lepidoptera; Crambidae) |
Autor |
Lopes, Denise Alves |
Unidade |
Pós-Graduação em Genética e Melhoramento |
Área de Concentração |
Genética e Melhoramento |
Orientador |
Profª Drª Maria Claudia Colla Ruvolo Takasusuki |
Co-Orientador(es) |
Profª Drª Maria de Fátima Pires da Silva Machado Profª Drª Claudete Aparecida Mangolin |
Banca Examinadora |
Profª Drª Maria Claudia Colla Ruvolo Takasusuki Profª Drª Ana Silvia Lapenta Prof. Dr. Helio Conte Profª Drª Sheila Michele Levy Drª Daniela de Oliveira Pinheiro |
Data de Defesa |
03/09/2009 |
Resumo |
As brocas do gênero Diatraea, como a D. saccharalis são consideradas como as principais pragas da cana-de-açúcar, estando distribuídas em todas as regiões canavieiras do país. A espécie D. saccharalis é encontrada em todo o Brasil infestando várias gramíneas e provocando, às vezes, perdas econômicas. Em países latinos americanos, o controle integrado é o método mais comum de conter este inseto. Além do controle biológico é realizado também o controle químico, ou seja, são utilizados vários tipos de inseticidas no controle da broca da cana de açúcar. O controle por meio de agroquímicos pode levar a ocorrência de resistência pelos insetos a estes compostos. Além do conhecimento dos mecanismos de resistência para que o controle de insetos pragas tenha eficiência é necessário conhecer a sua estrutura de populações. No presente estudo foi realizada a caracterização bioquímica das esterases de lagartas de D. saccharalis, a avaliação de alterações na atividade relativa das esterases e expressão das proteínas totais após contaminação com doses subletais de agroquímicos e; análise da genética de populações da broca da cana de quatro localidades do noroeste do Paraná e uma população do estado de São Paulo por meio do marcador RAPD. Ocorreu a inibição parcial da EST-7 e EST-8 e inibição total da EST-3 após o contato com organofosforado malathion. Os resultados obtidos permitiram verificar que há correlação entre a mortalidade e a concentração de malathion após contaminação por contato em todos os instares analisados. Assim, tanto o padrão de inibição quanto a correlação dose-mortalidade poderão ser utilizados como marcadores em novos estudos sobre resistência ao malathion. Uma nova região de proteína foi detectada após a contaminação por contato com o inseticida piretróide galgotrin que futuramente poderá ser utilizada para o entendimento de resistência a esse inseticida. A análise da genética de populações permitiu verificar que há alto polimorfismo RAPD, as populações analisadas não estão diferenciadas e que provavelmente está ocorrendo fluxo gênico. Esse contato entre as populações pode levar ao aumento de resistência aos inseticidas utilizados. Será importante que novas estratégias de manejo e controle dessa praga sejam desenvolvidas, dentre elas, a avaliação periódica do polimorfismo genético da D. saccharalis presentes na região, para dificultar a ocorrência de resistência cruzada aos inseticidas. |
Palavras-chave |
Diatraea saccharalis , resistência, agroquímicos, polimorfismos, genética de populações |
Title |
Molecular markers applied to analysis of pesticides contamination and population genetics of sugar cane borer Diatraea saccharalis Fabr. (Lepidoptera; Crambidae) |
Abstract |
D. saccharalis is the main pest of sugar cane, being distributed in all sugar cane crop in Brasisl. D. saccharalis. The species is found throughout Brazil infesting various grasses and causing economic losses. In Latin American countries, the integrated pest management is the most common method of containing D. saccharalis. In addition to biological control, are used several types of insecticides to management the sugar cane borer. The control by means of chemicals can lead to the occurrence of insect resistance to these compounds. Besides the knowledge of the mechanisms of resistance to the control of insect pests has efficiency is necessary to know the structure of population. In the present study was carried out biochemical characterization of esterases in larvae of D. saccharalis, the evaluation of changes in relative activity of esterases and total protein expression after contamination with sublethal doses of chemicals and, examining the sugarcane borer population genetic in four localities of northwest Parana and a population of São Paulo state by RAPD marker. After contamination by contact with Malathion organophosphate was detected partial inhibition of EST-7, EST-8 and total inhibition EST-3. The results showed that there is correlation between mortality and the concentration of malathion after contamination by contact in all instars analyzed. The inhibition pattern as the dose-mortality correlation may be used as markers in further studies on malathion resistance. A new zone of protein was detected after contamination by contact with the pyrethroid insecticide galgotrin that can be used to further the understanding of resistance to this insecticide. The analysis of population genetic showed high polymorphism RAPD, populations are not differentiated and gene flow is probably occurring. This contact between the populations can lead to increased resistance to insecticides used. It is important that new strategies for management and control of this pest are developed, including the periodic evaluation of the D. saccharalis genetic polymorphism, to hinder the occurrence of cross-resistance to insecticides. |
Key-words |
Diatraea saccharalis, resistance, agrochemicals, polymorphisms, genetics of population |
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