Dissertação
Título	Cariótipo e identificação de marcadores moleculares sexo-específico em Diatraea saccharalis
Autor	Heidemann, Celina Inês
Unidade	Pós-Graduação em Genética e Melhoramento
Área de Concentração	Genética e Melhoramento
Orientador	Profª Drª Maria Aparecida Fernandez
Co-Orientador(es)	Profª Drª Maria Claudia Colla Ruvolo Takasusuki Profª Drª Ana Sílvia Lapenta
Banca Examinadora	Profª Drª Maria Aparecida Fernandez Profª Drª Maria Albertina de Miranda Soares Profª Drª Eliana Valéria Patussi
Data de Defesa	10/09/2009
Resumo	Uma das razões para o interesse na genética e citogenética de lepidópteros é a grande quantidade de espécies pragas pertencentes a este grupo que causam perdas consideráveis na agricultura. Conseqüentemente, há necessidade de obter novas estratégias para o controle destas pragas. A Diatraea saccharalis é um inseto que ocasiona consideráveis prejuízos nas plantações de cana-de-açúcar. Nessa área de atuação, a nossa proposta foi de contribuir com o conhecimento da biologia de D. saccharalis, especificamente com os seguintes objetivos: (1) caracterizar citogenéticamente os cromossomos mitóticos de D. saccharalis; (2) descrever fragmentos envolvidos na diferenciação de macho e fêmea desta espécie, com o marcador molecular RAPD GyakuU-13 que é específico para o cromossomo W de Bombyx mori; (3) avaliar a população de D. saccharalis mantida no Departamento de Biologia Celular (DBC) da Universidade Estadual de Maringá, em relação à heterose e à distância genética. Para o desenvolvimento desses experimentos, foram analisadas preparações de placas metafásicas dos cromossomos mitóticos de células de hemolinfa de D. saccharalis; deferido o perfil de fragmentos obtidos com o marcador sexual GyakuU-13 de Bombyx mori; e estimada a variabilidade genética desta população proveniente da Usina de Santa Terezinha, Distrito de Iguatemi, Município de Maringá, que já era mantida por endocruzamentos no laboratório da Usina e foram trazidas para o DBC em 2004. Os resultados mostraram que a D. saccharalis apresenta 16 pares de cromossomos holocêntricos e similares em tamanho e forma em mais de 100 metáfases analisadas, não sendo possível a diferenciação sexual pela cariotipagem. Com o uso do marcador molecular foram identificados dois fragmentos, um de aproximadamente 610 e outro de 1400 pares de base, sugeridos como marcadores de D. saccharalis machos e fêmeas, respectivamente. O número elevado de fragmentos amplificados possibilitou a estimativa da heterozigosidade total (Ht) da população estudada que foi de 0,3560. Esse resultado demonstra que a população estudada apresenta considerável reserva de variabilidade genética. Em resumo os resultados obtidos contribuem para o conhecimento da biologia de D. saccharalis, de interesse para o desenvolvimento de novas metodologias e estratégias no controle dessa praga.
Palavras-chave	Diatraea saccharalis, cariótipo, marcador molecular sexo-específico.
Title	Karyotype and identification of sex-specific molecular markers in Diatraea saccharalis.
Abstract	One of the reasons for the interest in genetics and cytogenetics of lepidoptera is the enormous number of species of pests on this group that cause considerable damage in agriculture. Therefore, there is need for new strategies to control this pest. The Diatraea saccharalis is an insect that cause considerable loss in the sugar cane culture. In this area of work, our proposal was to contribute to the knowledge of the biology of D. saccharalis, especificaly with this following objectives: (1) characterize the mitotic chromosomes of D. saccharalis; (2) describe fragments involved in the differentiation between male and female of this species, with the molecular marker RAPD GyakuU-13, which is specific for the W chromosome of Bombyx mori; (3) evaluate the population of D. saccharalis raise in the Departamento de Biologia Celular e Genética da Universidade Estadual de Maringá (DBC), in face of heterosis and the genetic distance. For the development of these experiments were analyzed metaphasic plates of mitotic chromosomes from D. saccharalis hemolymph cells; deferred the profile of fragments obtained whit the sexual marker GyakuU-13 of Bombyx mori; and estimated the genetic variability of this population provided by Usina de Santa Terezinha, district of Iguatemi, city of Maringá, that already was maintained by inbreeding in the laboratory of the Usina Santa Terezinha and were brought for the DBC in the year 2004. The results showed that D. saccharalis has 16 pairs of holocentric chromosomes and similar in size and shape in more than 100 analyzed metaphases, but was not possible the sexual differentiation by karyotyping. The molecular marks analysis showed that two fragments, one of them with approximately 610 on the other one with 1400 pairs of base, could be correlated as markers of D. saccharalis male and female, respectively. The elevated number of amplified fragments allowed the estimation of total Heterozigosity (Ht) of the population, which was 0.3560. This result shows that the population has considerable reserve of genetic variability. In summary the results contribute to knowledge of the biology of D. saccharalis, of interest for the development of new methodologies and strategies for the control of this pest.
Key-words	D. saccharalis, karyotype, maker sex-specific.
Arquivos	Nome Tamanho m-ciheidemann.pdf 0,00 KB

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