Dissertação
Título	SNPs candidatos a marcadores para tolerância da soja a sulfoniluréias
Autor	Gioda, Mônica Drewin
Unidade	Pós-Graduação em Genética e Melhoramento
Área de Concentração	Genética e Melhoramento
Orientador	Ronald José Barth Pinto
Co-Orientador(es)	Ivan Schuster e Carlos Alberto Scapim.
Banca Examinadora	Gustavo André Simon Ivan Schuster Rubem Silvério de Oliveira Júnior Adriana Gonela
Data de Defesa	20/06/2011
Resumo	Os herbicidas da classe das sulfoniluréias apresentam grande potencial para aumentar a eficiência no controle de plantas daninhas resistentes ao ghyphosate. As sulfoniluréias inibem a enzima acetolactato sintase (ALS), a qual faz parte da rota metabólica da síntese de aminoácidos em plantas. Genótipos de soja mutantes que exibem tolerância às sulfoniluréias têm sido utilizados nos programas de melhoramento de soja visando à obtenção de cultivares com essa característica. Sendo assim, os objetivos desse trabalho foram isolar e sequenciar o gene ALS da soja, a fim de identificar a ocorrência de mutações relacionadas ao mecanismo de resistência a estes herbicidas e que possam ser utilizadas como marcadores para a seleção de genótipos resistentes. O material genético consistiu de três cultivares de soja, sendo elas CD 202, a qual não possui o gene mutado ALS, CD 252 e CD 216, as quais possuem o gene mutado ALS e são resistentes às sulfoniluréias. Uma sequência do gene ALS de Glycine max foi encontrada no GenBank e a mesma foi utilizada para desenhar cinco pares de primers para que o gene fosse amplificado em fragmentos menores, nas cultivares avaliadas. O fragmento 3 apresentou mutação do tipo troca de bases na posição 994 do gene ALS. Nesta posição a cultivar CD 202, a qual é suscetível, apresentou uma Adenina e as cultivares CD 252 e CD 216, as quais são resistentes, apresentaram uma Guanina. Quando a sequência foi traduzida, foi observado que a troca de bases gerou uma modificação na constituição de aminoácidos da proteína. A cultivar suscetível apresentou o aminoácido tirosina e as cultivares resistentes o aminoácido cisteína. A identificação de marcadores moleculares SNP’s que auxiliem na seleção dos genes ALS facilitará a introdução destes genes em cultivares de soja pelos programas de melhoramento.
Palavras-chave	ALS, sequenciamento, marcadores SNPs.
Title
Abstract	The herbicides from the sulfonylurea's class present great potential to enhance the eficiency on the glyphosate resistant weeds' control. Sulfonylureas inhibit the acetate lactate synthesis' (ALS) enzime, which is part of the aminoacid's metabolic route in plants. Mutant soybean's genotypes which exhibit tolerance to sulfonylureas have been used in soybeans's improvement programs aiming the obtainment of cultivars with this characteristic. Therefore, this issue's objectives was to isolate and sequenciate the gene Als from soybean in order to identify the occurrence of mutations related to the resistance mechanisms to this herbicides, so that they can be used as markers to the selection of resistant genotypes. The genetic material consisted in three soybean cultivars, the CD 202, which does not own the Als gene, and the resistant cultivars CD 252 e CD 216, both owning the Als gene. A sequence of the Als gene of Glycine max was found in the GenBank and the same was used to draw five pairs of primers so that the gene could be amplified into smaller fragments, in the evaluated cultivars. Fragment 3 presented mutation in the Als gene's position 994. In this position the cultivar CD 202, which is susceptible, presented an Adenine, and the cultivars CD 252 and CD 216, which are resistant, presented a Guanine. When the sequence was translated, it was observed that the bases change generates a modification in the constitution of the protein's amino acid. The susceptible cultivar presented tirosine amino acid and the resistant cultivars the cysteine amino acids. The identification of SNP molecular markers that aid in the Als genes selection will make the introduction of this genes in soybean cultivars by the biotechnological programs easier.
Key-words	ALS, sequencing, SNPs markers
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