Terça, 21 de maio de 2024.
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Dissertação
Título Citogenética clássica e molecular de pequenos caracídeos da bacia do rio Paraná, PR
Autor Silva, Leandro Ranucci
Unidade Pós-Graduação em Genética e Melhoramento
Área de Concentração Genética e Melhoramento
Orientador Profª Drª Isabel Cristina Martins dos Santos
Co-Orientador(es) Drª Ana Luiza de Brito Portela Castro.
Banca Examinadora Profª Drª Renata da Rosa
Profª Drª Luciana Andréia Borin
Data de Defesa 27/08/2014
Resumo Characidae engloba peixes de diferentes tamanhos, como espécies dos gêneros Moenkhausia e Astyanax, consideradas complexas sob o ponto de vista taxonômico. Neste estudo foram realizadas análises cariotípicas em populações de Astyanax fasciatus, coletadas no córrego 19 (município de Paraíso do Norte, PR), e em popoulações de Astyanax aff. paranae e Moenkhausia bonita, coletadas no rio dos Índios (município de Cianorte, PR), ambos rios pertencentes à bacia do rio Paraná. Os cromossomos mitóticos obtidos dessas espécies foram submetidas às análises com coloração Giemsa, detecção das regiões organizadoras de nucléolos pela impregnação com nitrato de prata (Ag-NOR), identificação da heterocromatina constitutiva (Banda C) e Double FISH ( DNAr 18S e 5S). A população de A. aff. paranae revelou 2n=48 cromossomos e fórmula cariotípica 14m+8sm+10st+16a com NF=80. Marcações Ag-NOR foram evidenciadas em apenas um par nucleolar, confirmados pelo FISH 18S. Sítios 5S se mostraram florescentes em região pericentromérica no par metacêntrico 3 e em dois cromossomos não homólogos de dois pares acrocêntricos, sendo uma delas sintênica, com 18S. O Bandamento C apresentou blocos conspícuos em regiões teloméricas de vário pares cromossômicos, sendo um deles coincidente com a NOR. A. fasciatus apresentou 2n=46 cromossomos constituídos por 14m+14sm+14st+4a e NF = 88. Sítios Ag-NOR foram evidenciados em apenas um dos homólogos de 3 pares cromossômicos, confirmados pelo FISH 18S, porém envolvendo ambos homólogos de 3 pares e um quarto par não marcado pela prata. FISH 5S revelou um par de metacêntricos (número 3) com marcações pericentroméricas em ambas populações com sítios adicionais em dois cromossomos não homólogos, próximas ao centrômero de um subtelocêntrico, sintênico a 18S e outro acrocêntrico. Blocos de heterocromatina foram evidenciados nas regiões teloméricas. M. bonita revelou 2n=50 cromossomos e fórmula cariotípica de 14m+24sm+8st+4a e NF=96 e ainda um cromossomo B em aproximadamente 57% das metáfases analisadas. M. bonita apresentou NOR simples, localizada no braço curto de um par de cromossomos metacêntricos, coincidente ao FISH 18S. As sondas de DNAr 5S hibridizaram nas regiões intersticiais e pericentroméricas de quatro pares de cromossomos. M. bonita mostrou poucos blocos heterocromáticos na maioria dos cromossomos, destacando-se marcações mais fortes no par nucleolar e nas regiões teloméricas de alguns cromossomos. O cromossomo B apresentou-se eucromático. Estes dados representam uma importante contribuição para a estimativa da biodiversidade de pequenos caracídeos da bacia do alto rio Paraná, gerando informações citogenéticas para Astyanax fasciatus e A. aff. paranae, considerados complexos sob o ponto de vista taxonômico, e ainda dados inéditos de M. bonita. Portanto, este conjunto de informações fornecem subsídios para futuros estudos taxonômicos e evolutivos em peixes neotropicais.


Palavras-chave Caracídeos, FISH, Ag-NOR.
Title
Abstract Characidae includes fish of different sizes, such as Moenkhausia and Astyanax species, which are considered complex under the taxonomic point of view. In this study, were performed karyotype analysis of Astyanax aff. paranae and Moenkhausia bonita from Indians river (Cianorte, PR) and Astyanax fasciatus populations from the 19 stream (Paraíso do Norte, PR), both rivers belonging to the Paraná River basin. Mitotic chromosomes obtained from these species were analyzed with Giemsa staining, impregnation with silver nitrate (Ag-NOR) to detection of the nucleolar organizer regions, C-Band to identification of constitutive heterochromatin and Double FISH (18S rDNA and 5S). The population of A. aff. paranae showed 2n = 48 chromosomes and karyotype formula of 14m + 8sm + 10st + 16a, NF = 80. The AgNORs, confirmed by 18S FISH, located in only one nucleolar pair. The 5S rDNA cistrons were located in pericentromeric region of pair 3 (metacentric) and in two not homologous chromosomes pairs (acrocentric), which in one pair were observed synteny with 18S. C-banding conspicuous blocks presented in telomeric regions of different chromosome pairs, one being coincident with the NOR. A. fasciatus presented 2n = 46 chromosomes consisting of 14m+14sm+14st+4a and NF = 88. Ag-NOR sites were observed in only one of the homologues of 3 pairs. FISH 18S showed sites in both homologues of 3 pairs and in a fourth pair not marked by silver nitrate. FISH 5S revealed a pair of metacentric (pair 3) with pericentomeric markings in both populations. Additional sites close to the centromere were noticed in two chromosomes, an acrocentric and in a subtelocentric, syntenic with 18S. Heterochromatin blocks were evidenced in the telomeric regions. M. bonita showed 2n = 50 chromosomes and karyotype formula of 14m + 24sm + 8st + 4a, NF = 96. Additionally, a B chromosome was found in approximately 57% of the analyzed metaphases. M. bonita presented simple NOR, located on the short arm of a pair of metacentric chromosomes. The 5S rDNA probes hybridized in interstitial and pericentomeric regions of four pairs of chromosomes. Concerning C-bainding, M. bonita presented few heterochromatic blocks in most of the chromosomes, with stronger markings on the nucleolar pair and in telomeric regions of some chromosomes. B chromosome were euchromatic. These data represent an important contribution to the estimation of the biodiversity of small species of the Paraná high basin, adding cytogenetic information to Astyanax fasciatus and A. aff. paranae, considered complex from a taxonomic point of view and still unpublished data of M. bonita, therefore set of information provides subsidies for future taxonomic and evolutionary studies in neotropical fish.

Key-words Characins, FISH, Ag-NOR.
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