Terça, 28 de maio de 2024.
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Tese
Título Avaliação do comportamento meiótico e da viabilidade polínica em híbridos de Brachiaria decumbens resistentes à degrana.
Autor Cruz Baldissera , Joana Neres da
Unidade Pós-Graduação em Genética e Melhoramento
Área de Concentração Genética e Melhoramento
Orientador Claudete Aparecida Mangolin
Co-Orientador(es) André Luis Laforga Vanzela
Cacilda Borges do Valle
Satiko Nanya
Banca Examinadora Claudete Aparecida Mangolin,
Andréa Beatriz Mendes Bonato
Satiko Nanya, da Univers
André Luis Laforga Vanzela
Cacilda Borges do Valle
Data de Defesa 17/12/2014
Resumo O objetivo deste trabalho foi avaliar os híbridos de Brachiaria decumbens com resistência a degrana natural e selecionar os que apresentarem o melhor desempenho na microsporogênese e na porcentagem de pólen viável para serem utilizados no programa de melhoramento da Embrapa Gado de Corte. A diversidade genética no gênero Brachiaria é restrita, e, portanto cruzamentos intra e interespecíficos são realizados para gerar variabilidade. Acessos de B. decumbens foram cruzados e na geração F1, os híbridos resistentes a degrana natural foram selecionados. Após a seleção, avaliações citogenéticas foram realizadas para identificar as anormalidades meióticas que poderiam interferir na viabilidade do pólen e consequentemente na produção de sementes. Para os estudos meióticos, inflorescências jovens foram coletadas de 27 híbridos, fixadas em uma solução de 6 etanol: 3 clorofórmio: 2 ácido propiônico por 24 horas e armazenadas em álcool 70% sob refrigeração. Os microsporocitos e os grãos de pólen foram preparados utilizando a técnica de esmagamento e coloração com carmim propiônico a 1% e observadas sob microscopia de luz. Para cada híbrido, foram analisadas 100 células em cada fase da meiose, compreendidas entre a diacinese e a tétrade. As associações cromossômicas foram analisadas na diacinese e a contagem do número de cromossomos em anáfase I. O comportamento cromossômico foi analisado em metáfase I até a tétrade, sendo que as porcentagens de irregularidades computadas estavam relacionadas a segregação irregular dos cromossomos, formação de micronúcleos, micrócitos e políades. As porcentagens de tétrades anormais e dos grãos de polens inviáveis foram submetidas a análise de variância utilizando o programa SAS 9.2. Após, foi aplicado o teste de comparação de médias, Scott Knott ao nível de 5% de probabilidade de erro utilizando o programa Genes. Todos os 27 híbridos analisados são tetraploides (2n-4x=36). A frequência de anormalidades na meiose variou de 7% a 100% entre as fases e os híbridos, sendo que o comportamento dos cromossomos durante a meiose caracteriza assincronia do genoma. No produto final da meiose, as principais irregularidades encontradas foram micronúcleos, micrócitos e políades. A porcentagem de pólen viável foi baixa variando de 0,6% a 31%. Dos 27 híbridos intraespecíficos, podem ser mantidos no processo de desenvolvimento de novas cultivares e também serem utilizados como doadores de pólen os híbridos apomíticos R158, R169 e R184, enquanto que os híbridos sexuais mais promissores que podem ser aproveitados em novos cruzamentos como receptores de pólen são R161, R163, R165, R167, R181, R193, S47, Y21 e Z9.
Palavras-chave Meiose; Melhoramento; Gramíneas forrageiras
Title
Abstract The objective of this research was to select hybrids with better performance in microsporogenesis and with lower percentage of unviable pollen to be used in the forage improvement programs of Embrapa Gado de Corte. The genetic diversity in the genus Brachiaria is restricted and intra- and interspecific crosses are being performed to create variability. Accessions of Brachiaria decumbens, were crossed and in the F1 generation hybrids that retained seeds in the inflorescence were selected. After selection, cytogenetic evaluations were performed in hybrids to identify meiotic abnormalities which could be detrimental to pollen viability and consequently to seed production. For the meiotic studies, young inflorescences were collected from twenty seven intraspecific hybrids, fixed in a mixture of 6 ethanol: 3 chloroform: 2 propionic acid for 24 h and stored under refrigeration. The microsporocytes and the pollen grains were prepared by smear and staining with 1% propionic carmine and analyzed under light microscopy. For each hybrid, 100 cells in each phase of meiosis, between the diakinesis and tetrad stages were analyzed. Chromosomal associations were analyzed in diakinesis and the counting of chromosome number in anaphase I. The chromosome behavior was analyzed in metaphase I until the tetrad, and the percentages of irregularities were related to irregular segregation of chromosomes, micronuclei formation, and polyads microcytes. The percentages of abnormal tetrads and unviable pollen were subjected to analysis of variance with the SAS 9.2 software. After, the Scott Knott test was applied at 5% probability of error with the GENES program. The hybrids are tetraploid (2n = 4x-36). The frequency of meiotic abnormalities varied between 7% and 100% between phases and hybrids, and the behavior of chromosomes during meiosis characterizes asynchrony of genomes. In the final product of meiosis, the main abnormalities identified were micronuclei, microcytes and polyads. The hybrids showed low frequency of viable pollen, between 0,6% to 31% which differed among the 27 hybrids. Of the 27 intraspecific hybrids, the apomictic hybrids R158, R169 and R184 can be kept for the development of new cultivars process and also be used as pollen donors, whereas the most promising sexual hybrids that can be utilized in new crossings as pollen receptors are R161, R163, R165, R167, R181, R193, S47, Y21 and Z9.



Key-words Meiosis; Breeding; Forage Grass.
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