Quinta, 03 de outubro de 2024.
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Dissertação
Título Comportamento cromossômico na viabilidade polínica e produção de sementes em híbridos de Brachiaria
Autor Ragalzi, Celina de Medeiros
Unidade Pós-Graduação em Genética e Melhoramento
Área de Concentração Genética e Melhoramento
Orientador Maria de Fátima Pires da Silva Machado
Co-Orientador(es) Andréa Beatriz Mendes-Bonato
Claudete Aparecida Mangolin
Cacilda Borges do Valle
Banca Examinadora Claudete Aparecida Mangolin
Andréa Beatriz Diverio Mendes
Cacilda Borges do Valle
Data de Defesa 22/02/2019
Resumo A diversidade genética no gênero Brachiaria é restrita e, portanto, cruzamentos intra e interespecíficos são realizados para gerar variabilidade. Levando em consideração o caráter poliploide deste gênero, avaliações citogenéticas são realizadas para identificar as anormalidades meióticas que podem interferir na viabilidade do pólen e, consequentemente, na produção de sementes. Portanto o objetivou deste trabalho foi avaliar o comportamento meiótico e a viabilidade polínica de oito híbridos interespecíficos sexuais de Brachiaria, pertencentes ao programa de melhoramento da Embrapa Gado de Corte – MS, e relacionar estes dados com a produção final de sementes puras de cada híbrido. Para os estudos meióticos, inflorescências jovens foram coletadas, fixadas em uma solução preparada com 6 partes de etanol, 3 partes de clorofórmio e 2 partes de ácido propiônico por 24 horas e armazenadas em álcool 70%, sob refrigeração. Os microsporócitos foram preparados utilizando a técnica de esmagamento e corados com carmim propiônico a 1% e observados sob microscopia de luz. Para cada híbrido, foram analisadas aproximadamente 100 células em cada fase da meiose. Para os estudos de viabilidade polínica foram feitos testes colorimétricos com grãos de pólen in vivo utilizando os corantes: carmim propiônico 1%, reativo de Alexander, lugol e cloreto de trifeniltetrazólio (TTC). Os grãos de pólen eram depositados em lâminas, para cada corante foram feitas três lâminas. O comportamento cromossômico foi analisado em metáfase I até a tétrade de micrósporos. As anormalidades observadas foram: segregação irregular dos cromossomos, aderência cromossômica, citomixia e fusão celular, assincronia de ritmo meiótico e falhas na formação do fuso. A frequência de anormalidades na meiose variou de 1,96% de produtos finais anômalos no híbrido 460-9 a 92,31% de telófases II com micronúcleos também no híbrido 460-9. No produto final da meiose, as principais irregularidades encontradas foram micronúcleos, micrócitos e políades. A viabilidade do pólen variou de 38,37% a 64,89% considerando os quatro corantes analisados. A alta frequência de irregularidades meióticas afetou a viabilidade do pólen e apresentou uma relação positiva com a produção de sementes puras.


Palavras-chave Microsporogênese; gramíneas forrageiras; melhoramento.
Title
Abstract Genetic diversity in the Brachiaria genus is restricted and, therefore, intra and interspecific crossings are performed to generate variability. Taking into consideration the polyploid character of this genus, cytogenetic evaluations are executed in order to identify meiotic abnormalities that may interfere with the viability of pollen and consequently in the production of seeds. Therefore the objective of this work was to evaluate the meiotic behavior and pollen viability of eight interspecific sexual hybrids of Brachiaria, belonging to the breeding program of Embrapa Beef Cattle - MS, and relate these data to the final production of pure seeds of each hybrid. For meiotic studies, young inflorescences were collected, fixed in a solution prepared with 6 parts of ethanol, 3 parts of chloroform and 2 parts of propionic acid for 24 hours and stored in 70% alcohol, under refrigeration. Microsporocytes were prepared using crushing technique, stained with 1% propionic carmine, and observed under light microscopy. For each hybrid, approximately 100 cells at each phase of meiosis. For the pollen viability studies, colorimetric tests with pollen grains in vivo using the dyestuff: carmine 1% propionic acid, reactive of Alexander, lugol and triphenyltetrazolium chloride (TTC). The grains of pollen were deposited on slides, three slides were made for each dye. The chromosomal behavior was analyzed in metaphase I until the tetrad of microspores. The observed abnormalities were: irregular segregation of chromosomes, chromosomal adhesion, cell cytomixia and fusion, asynchrony of meiotic rhythm and faults in spindle formation. The frequency of abnormalities in meiosis ranged from 1.96% of anomalous end products in the hybrid 460-9 to 92.31% of telophases II with micronuclei also in the hybrid 460-9. In the final product of meiosis, the main irregularities were micronuclei, microcytes and polyades. The viability of the pollen ranges from 38.37% to 64.89% considering the four dyes analyzed. The high frequency of meiotic irregularities affected the viability of the pollen and presented a positive relation with the production of pure seeds.

Keywords:
Key-words Chromosomal abnormalities; microsporogenesis; forage grasses; improvement.
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