Quinta, 25 de abril de 2024.
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Dissertação
Título Análise genética de polimorfismos bioquímicos em linhagens do bicho-da-seda (“Bombyx mori” L.)
Autor Ronqui, Ludimilla
Unidade Pós-Graduação em Genética e Melhoramento
Área de Concentração Genética e Melhoramento
Orientador Profª Drª Maria Claudia Colla Ruvolo Takasusuki
Co-Orientador(es) Profª Drª Claudete Aparecida Mangolin
Prof. Dr. Erasmo Renesto
Profª Drª Maria Aparecida Fernandez
Banca Examinadora Profª Drª Maria Claudia Colla Ruvolo Takasusuki
Profª Drª Maria Aparecida Fernandez
Jussara Ricardo de Oliveira
Data de Defesa 19/12/2006
Resumo O bicho-da-seda ("Bombyx mori" L.) é considerado um inseto de grande importância econômica. Os híbridos atualmente explorados pelo aproveitamento da heterose são provenientes principalmente de raças japonesas e chinesas. Este trabalho teve como objetivo avaliar o polimorfismo em lagartas do bicho-da-seda de diferentes linhagens utilizando a eletroforese de isoenzimas para detectar marcadores bioquímicos e investigar a genética de populações para essas linhagens. Foram utilizados como amostras extratos individuais de glândulas sericígenas de lagartas do segundo dia da quinta idade, de sete linhagens japonesas e oito linhagens chinesas puras mantidas pela Cocamar - Cooperativa Agroindustrial de Maringá. As isozimas fosfatase ácida (ACP), fosfatase alcalina (AKP) e anidrase carbônica (CA) foram avaliadas por meio de eletroforese em géis de amido de milho (Penetrose 30, Corn Products of Brazil) a 14%. As esterases (EST) foram analisadas por meio de eletroforese vertical em géis de poliacrilamida a 10% e coloração com alfa e beta-naftil acetato. A análise estatística foi realizada por meio do programa Popgene 1.31. Foram observados 21 locos, dentre os quais quatro (19,05%) são polimórficos, "Est-11, Acp, Akp, Ca". Os alelos da ACP apresentaram freqüências de 0,300; 0,3917 e 0,3083 respectivamente para "Acp-1A, Acp-1B e Acp-1C". A freqüência dos alelos da AKP foi de 0,2500 para "Akp-1A", 0,5333 "Akp-1B" e para "Akp-1C" 0,2167. Para a anidrase carbônica foram detectados dois alelos com freqüências de 0,4750 e 0,5250 para "Ca-1A" e "Ca-1B" respectivamente. E para a EST-11 as freqüências foram de 0,8974 e 0,1026 Est-1A e Est-1B respectivamente. A heterozigosidade média observada foi de 0,0350, enquanto a heterozigosidade esperada foi 0,0929. O índice de fixação (Fis) para as isozimas analisadas foi – 0,0452, indicando que ainda há excesso de heterozigotos. O valor de Fst (0,676) permite sugerir que as linhagens estão bem diferenciadas e que não ocorre fluxo gênico entre elas (0,1194). O dendrograma obtido a partir dos valores de distância genética não separou totalmente as linhagens chinesas e japonesas analisadas. Essa avaliação preliminar das linhagens de "B. mori" demonstrou que elas possuem potencial genético que pode ser utilizado em programas de cruzamentos que tenham a finalidade de produzir híbridos para produção de seda.
Palavras-chave Genética animal, Marcadores bioquímicos, Sericicultura.
Title Genetic analysis of biochemical polymorphism in silkworm (Bombyx mori L.) lines.
Abstract The silkworm (Bombyx mori L.) it is an insect of great economical importance. The hybrid now explored by the use of the heterose are originating from Japanese and Chinese races. This work carried out to evaluates the polymorhism in the silkworm of different lineages using the isoenzymes electrhophoresis to detect biochemical markers and to investigate the genetics of populations for those lineages. They were used as samples individual extracts of silk glands of second day old larvas of the fifth instar, originating from seven Japanese lineages and eight pure Chinese lineages maintained by the Cocamar-Cooperativa Agroindustrial de Maringá. The isozymes acid phosphatase (ACP), alkaline phosphatase (AKP) and carbonic anhydrase (CA) they were submitted to the electrophoresis in starch gels (Penetrose 30, Corn Products of Brazil) to 14%. The esterases (EST) were analyzed through vertical polyacrylamide gels at 10%, and stained with and α and b-naphtyl acetate. The statistics analysis was carried out with Popgene 1.31 sofware program. There were observed 21 loci, which among them four (19.05%) are considered polymorphic, Est-11, Acp, Akp and Ca. The ACP’s alleles presented frequencies of 0.300; 0.3917 and 0.3083, respectively, for Acp-1A, Acp-1B and Acp-1C. The frequency of AKP’s alleles were 0.2500, 0.5333 and 0.2167, respectively, for Akp-1A; Akp-1B and Akp-1C. However, for CA were detected two alleles with frequency of 0.4750 and 0.5250, for Ca-1A and Ca-1B, respectively. The frequencies observed for EST-11 were 0.8974 and 0.1026, for Est-1A and Est-1B, respectively. The mean heterozygosity observed was 0.0350, while the expected heterozygosity was 0.0929. The fixation index (Fis) for the analyzed isozymes was 0.0452, indicating that there is an excess of heterozygous. The Fst value (0.676) allows to suggest that the lineages are well differentiated, and there is not genic flown among them (0.1194). The dendrogram obtained from values of genetic distance did not separate the Chinese and Japanese lineages analyzed. Thus, this preliminary evaluation of B. mori lineages demonstrated that they present genetic material that it could be used in breeding programs that intend to produce hybrids for silk production.
Key-words Animal genetics, Biochemistry markers, Sericulture.
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